液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography，簡稱HPLC）又叫做高壓或高速液相色譜、高分離度液相色譜或近代柱色譜,以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，是色譜法的一個重要分支。液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎上，引用了氣相色譜的理論，在技術(shù)上，流動相改為高壓輸送(zui高輸送壓力可達4.9´107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達幾萬或幾十萬);同時柱后連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進行連續(xù)檢測。
大豆黃卷為豆科植物大豆的種子發(fā)芽后曬干而成。對肺炎球菌、金黃色葡萄球菌等均有抑制作用?？共《咀饔茫河糜诓《拘愿忻?、流感。具有清熱透表；除濕利氣的功效。
本品為豆科植物大豆Glycine max(L.)Merr.的成熟種子發(fā)芽干燥而得。大豆用水浸泡至膨脹，將水放出，用濕布覆蓋，每日用清水沖洗一次或噴淋二次，待芽長至0.5cm～1cm時，取出，干燥。
「性狀」 本品略呈腎形，長約8mm，寬約6mm。表面黃色或黃棕色，微皺縮，一側(cè)有明顯的臍點，一端有1彎曲胚根。外皮質(zhì)脆，多破裂或脫落。子葉2片，黃色。氣微，味淡，嚼之有豆腥味。以粒大、飽滿者為佳。
「鑒別」 (1)取本品粉末1g，加稀乙醇30ml，超聲處理30分鐘，離心(3000轉(zhuǎn)/分鐘)10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加稀乙醇1ml使溶解，取上清液， 作為供試品溶液。另取亮氨酸對照品，加稀乙醇制成每1ml 含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄Ⅵ B)試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(19：5：5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液， 在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(2)取本品粉末2g，加80%乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加80%乙醇1ml使溶解，取上清液，作為供試品溶液。另取染 料木苷對照品，加80%乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄ⅥB)試驗，吸取供試品溶液5～10μl、對照品溶液2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(10：1.7：1.3)為展開劑，展開缸 中預飽和30分鐘，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鋁乙醇溶液，在105℃加熱數(shù)分鐘，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜 相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
「檢查」水分 不得過11.0%(附錄Ⅸ H)。
總灰分 不得過7.0％(附錄Ⅸ K)
「含量測定」 照液相色譜法測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇為流動相A，以1%醋酸溶液為流動相B，按下表進行梯度洗脫；柱溫35℃；檢測波長為260nm。理論板數(shù)按大豆苷、染料木苷峰計算均不得低于5000。
時間(分鐘) A(%) B(%)
0～25
25～33 28
28→45 72
72→55對照品溶液的制備 取大豆苷、染料木苷對照品各約10mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加70%甲醇至刻度，搖勻；精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。
供試品溶液的制備 取本品粉末(過四號篩)約1.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇25ml，稱定重量，加熱回流2小時，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補足減失的重量，搖勻，離心(2000轉(zhuǎn)/分鐘)10分鐘，取上清液，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品按干燥品計算，含大豆苷(C21H20O9)和染料木苷(C21H20O10)的總量不得少于0.08%。
「炮制」 取燈心草、淡竹葉置鍋內(nèi)，加入適量水煎煮二次，*次60分鐘，第二次30分鐘，合并煎液，濾過。濾液與大豆黃卷共置鍋內(nèi)，煮至藥液被吸盡，取出，干燥。
每100kg凈藥材用燈心草1kg、淡竹葉2kg。
Syltech500型液相色譜儀(單泵配置/梯度)
1 泵 P501型恒流高壓輸液泵
1.1 液體輸送原理：雙柱塞串聯(lián)往復方式，自動脈沖抑制系統(tǒng)，另配有溶劑壓縮因子程序，能自動補償流量，液體輸送更
1.2 zui大輸送壓力：大于等于6000PSI(約42MPa以上)
1.3 流速精度：0.1%
1.4 流速范圍：(0.001-10.000)mL/minzui小增量0.001mL/min
1.5 柱塞桿清洗：不需另配設備即可自動柱塞桿清洗，保護柱塞桿
1.6 安全性：配有開機自檢，高低壓報警和保護功能
1.7 梯度系統(tǒng)：二元梯度混合系統(tǒng)/單泵系統(tǒng)
混合范圍 | 混合原理 | 混合液體數(shù) | 脫氣裝置 |
0到100% | 高壓混合 | 大于等于2 | 內(nèi)外置脫氣可 |
2 紫外檢測器UV501型紫外可變波長檢測器
光源 | 氘燈(鎢燈可選)氘燈壽命2000個小時，保證使用壽命1000小時以上 |
波長范圍 | 190到720nm(步增1nm) |
波長準確度 | <±1nm |
波長重現(xiàn)性 | <±0.5nm |
帶寬 | 小于5nm |
噪音 | <±2.5*10-U(特定條件下) |
漂移 | <±2.5*10-4AU(特定條件下) |
流通池體積 | 10ul體積、光程10mm |
吸收量程 | 0.01AU/V-10AU/V(共十檔)進樣信號控制(事件)，自動調(diào)零 |
功能 | 具有定點波長測量，數(shù)據(jù)處理硬件嵌入檢測器，數(shù)字信號直接采集處理功能 |
3 色譜柱：VertexTMXB-C18 4.6*250mm*5um 液相色譜柱、配保護柱
4 柱溫箱：室溫上10度到100度(0.1度增量)
5 N2010藥典版色譜工作站：色譜工作站(滿足2010版藥典要求，美國制作)中英文操作軟件，支持WIN9X/XP/2000/2003等操作系統(tǒng)，硬件嵌入檢測器，數(shù)字信號直接采集處理
6 Vertex7825i手動進樣閥：Vertex7825i手動進樣閥(帶遠程觸發(fā)開關)，自帶20UL定量，耐壓8000psi，進樣次數(shù)超1萬次以上
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